SDS-PAGE Gel Rezepte

Wenn Ihre Zielproteine eine Molekülmasse zwischen 20 und 200 kDa haben, verwenden Sie ein herkömmliches SDS-PAGE-Gel, welches Sie mit den unten gezeigten Rezepturen herstellen können. Der prozentuale Anteil an Gel den Sie benötigen entspricht der Molekülmasse Ihres Zielproteins.

Rezept 1

Separating Gel (mls, total 10ml)
MW of target protein (kDa)	80-200	35-100	25-60	20-40
Gel Percentage	8%	10%	12%	15%
ddH2O	2.1	1.5	0.8	0
30% Acrylamide	2.7	3.3	4	5
2x Separating Buffer	5.0	5.0	5.0	5.0
10% APS	0.1	0.1	0.1	0.1
TEMED	0.01	0.01	0.01	0.01

Stacking Gel (mls) 4ml
	4ml	6ml	8ml
MW of target protein (kDa)	-	-	-
Gel Percentage	4%	4%	4%
ddH2O	1.4	2.1	2.7
30% Acrylamide	0.5	0.8	1.1
2x Stacking Buffer	2.0	3.0	4.0
10% APS	0.04	0.06	0.08
TEMED	0.004	0.006	0.008

 

Rezept 2

2x Separating Buffer Recipe (makes 1000ml)
Tris HCl (pH 8.8)	90.8g
SDS	2.0g
Lösen Sie die Verbindungen gründlich auf. Stellen Sie mit konzentrierter HCl den pH-Wert langsam auf 8,8 ein und fügen Sie dann 1000 ml ddH2O hinzu.

 

Rezept 3

2x Stacking Buffer Recipe (makes 1000ml)
Tris HCl (pH 6.8)	30.35g
SDS	2.0g
Lösen Sie die Verbindungen gründlich auf. Stellen Sie mit konzentrierter HCl den pH-Wert langsam auf 6,8 ein und fügen Sie dann 1000 ml ddH2O hinzu.

 

Rezept 4

1x Running Buffer Recipe (makes 1000ml)
Tris-base	1.51g
Glycine	7.5g
SDS	0.5g
Lösen Sie die Verbindungen gründlich auf und fügen Sie dann 1000 ml ddH2O hinzu.